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兔场实验室细菌培养技术

文章主题:养兔技术  文章来源:农业百科  发布时间:2017-07-29

细菌分离培养是兔场实验室诊断工作中一个十分重要的步骤,通过对细菌的分离和纯培养,可以根据菌落的形态、大小、结构、色泽、气味以及有无溶血等情况进行初步鉴定,然后通过进一步的染色镜检或者是特殊培养进行鉴定或研究,为病原的确诊提供依据。

1.培养基制备培养基是细菌学检查过程中非常重要的材料,它含有细菌生长所必需的营养物质,细菌经过培养基的纯培养,才能够进行准确的检查,得到可靠的结果。

(1)肉水的制作:

①材料:瘦牛肉500克,蒸馏水(或常水)1000毫升。

②方法:取瘦牛肉除去脂肪、肌腱,切成碎块或绞碎,按1千克牛肉2千毫升水的比例,加水浸泡一夜,煮沸一小时,用纱布初步滤去肉渣挤出肉水,再用滤纸滤过,补足原有水量,装入烧瓶中置高压灭菌器中120℃20分钟灭菌,制成肉水。

制作肉水的另一种方法是:取牛肉浸膏0.5-1.0克,加蒸馏水100毫升,加热溶解,滤纸滤过,并同上述方法进行灭菌即成。

③用途:制作各种培养基的基础。

(2)营养肉汤:

①材料:肉水1000毫升,蛋白胨IO克,氯化钠5克。

②方法:将蛋白胨和氯化钠加入肉水中,稍加热溶解,用氢氧化钠溶液调整pH值为7.4-7.6之间,再加温使溶液均匀。滤过分装后高压灭菌备用。

③用途:可供一般的细菌生长需要,检查细菌的生长表现,也可作为制作固体培养基的基础。

(3)营养琼脂:

①材料:营养琼脂粉40克,蒸馏水1000毫升。

②方法:将营养琼脂粉加入蒸馏水中,搅拌浸泡1小时,加热使充分溶解,高压灭菌备用。

③用途:分离细菌纯培养及作为其他特种培养基的基础。

(4)血液琼脂培养基:

①材料:脱纤维血5-10毫升,营养琼脂100毫升。

②方法:准备好灭菌并有玻璃珠的三角烧瓶,无菌采集血液,注入三角烧瓶中,不停地摇动,直至血纤维分离为止,一般需要10分钟。

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