对母牛的发情做出正确的判断叫发情鉴定。发情鉴定的目的是对发情母牛确定最适宜的配种时间，提高受胎率。常用的母牛发情鉴定方法有以下几种。
主要是根据母牛的精神状态和外阴部的变化来判断是否发情，是鉴定母牛发情最主要的方法。一般在上次发情后的第15天以后，要注意观察母牛是否有发情表现。
发情母牛兴奋不安，大声鸣叫，食欲减少，弓腰举尾，频繁排尿，相互舔嗅后躯和外阴部，发情母牛接受其他母牛或公牛的爬跨，或爬跨其他牛。如被爬跨的牛站立不动并举尾，说明被爬跨的母牛发情，如拱背逃走，说明不是发情母牛；母牛爬跨其他牛时，阴门搐动并滴尿，具有公牛交配的动作，说明该母牛发情。
对于放牧牛群，可选择性欲旺盛、年轻、健康的公牛作为试情公牛，通过观察母牛的性欲表现来判断其是否发情。
此方法是目前所实行的极为广泛而又比较准确的鉴定方法。通过将手伸入母牛的直肠内，隔着直肠而触摸卵泡发育情况，判断母牛是否发情。此种方法应由经验丰富的专业技术人员操作，并注意操作安全和卫生。
用阴道开膣器插入母牛的阴道内，观察阴道黏膜颜色、润滑度、子宫颈口的颜色、肿胀以及开张程度和黏液状况来判断是否发情。其方法是：
先将母牛保定在配种架内，用绳子把尾巴拴向一侧,外阴部清洗消毒，开膣器清洗擦干后，用75%的酒精棉球涂擦消毒，涂上灭菌过的润滑剂。左手指将阴唇分开，右手持开膣器稍向上插入阴门，然后再按水平方向插入阴道，打开开膣器通过手电筒或反光镜的光线检查阴道内和子宫颈变化，判断母牛发情与否。
母牛发情与否还可用仿生法、孕酮含量测定法、离子选择电击法、光感排卵记载法等方法测定。
