5)菌种分离和培养：可用采集野生的活灵芝或培养的活灵芝和保存的菌种。活灵芝经表面消毒后，用锋快小刀，取菌盖或芝柄组织，在无菌下接种。要储备一定数量的菌种。菌种培养基的成分组成，常用的有两种：
地瓜培养基：地瓜2509、葡萄糖209、琼脂17～209、水1000m1、酸碱度(ph)6。
马铃薯培养基：马铃薯2509、葡萄糖209、琼脂17～209、加水1000m1、酸碱度(ph)6。
以上两种培养基均可作为菌种培养基。方法是将马铃薯或地瓜等去皮、挖去芽眼切成片或丝状，加水500～600ml，放入搪瓷锅内，煮开后经15～20分钟，用纱布、脱脂棉滤过，滤后放入琼脂熬溶，再加各种原料。待溶解后另行滤过分装(水分一定要保持1000m1)，1．96×105p、30分钟高压灭菌或蒸笼90分钟(以水沸蒸算起)。灭菌后分装各试管中，塞上棉花塞，趁热斜放，使培养基形成适当的斜度备用。按常规无菌操作法接种在试管中，放在25-28℃的恒温箱或培养室内，培养7～10天即可使用。最好购买一点菌种。
6)接种时间：一般在5～10月。有恒温条件者，全年均可培养。将试管中培养的菌种，在无菌条件下，以接种针挑取一块菌丝(约一分硬币直径大小)，打开装有培养基广口瓶的棉花塞，将菌丝体置于副孔接种点上，塞好棉花塞。放在培养室里培养。
(2)段木栽培
1)段木栽培用料：主要以木质较硬的桦树、栎树、苹果树、按树、洋槐、悬铃木等。段木直径一般在5～15cm。选定树种后立即砍伐，但不必剥皮，锯成长为lm的段木。如果树种含水率较高，则要堆积干燥，直至用木楔打进段木内，不见流出树液时，便可接种。
2)菌种制备：用looml水，加蔗糖29、麦麸59制成营养液，煮沸半小时后捞出并按4：1比例，将木屑、麦麸培养料混合装瓶，高压灭菌，接种培养。待菌丝长至瓶底，再继续培养10天左右即成菌种。
