易感雏鸭接种：用病毒分离材料、鸭胚或鸡胚分离毒的尿囊液接种1-7日龄易感雏鸭5-10只，皮下或肌肉注射．0.2-0.5毫升／只。接种24小时后开始发病和死亡，并具有典型临床症状和病理变化。
细胞培养：将病毒分离材料接种单层鸭胚肝细胞，室温吸附15分钟，加入细胞营养液，37℃温箱培养后观察，该病毒能引起细胞变圆等病变。
(2)血清学诊断方法：
抗体保护试验：使用抗鸭病毒性肝炎高免血清或抗鸭病毒性肝炎特异蛋黄抗体，皮下注射1-7日龄易感健康雏鸭5只，1-2毫升／只。分离病毒尿囊液，皮下或肌肉注射攻毒。5只未注射抗血清的对照组雏鸭同时攻毒。饲养观察7天，如果注射特异抗体组的雏鸭有80%-100%存活，对照组雏鸭有80%-100%死亡，即可判定分离毒株为鸭肝炎病毒。
饲养观察7天，如果免疫组有80%-100%雏鸭存活，而对照组有80%-100%死亡，即可判定分离毒株为鸭病毒性肝炎病毒。
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